queratinase - Keratinase
Queratinases são enzimas proteolíticas que digerem queratina .
Conteúdo
História
Eles foram inicialmente classificados como 'proteinases de mecanismo desconhecido' do Comité Nomenculture na União Internacional de Bioquímica em 1978 com o número CE 3.4.99 em 1983 (Owen et al., 1983). Na década de 1990, que foram definidas como uma serina-proteases , devido à elevada homologia de sequência com a protease alcalina , e a sua inibição por inibidores de serina-protease (Wang et al, 1995;... Taha et al, 1998 e Bressollier et a1, 1999).
Função
Queratinases são produzidos apenas na presença de substrato contendo queratina. Eles atacam principalmente a ligação dissulfureto (-SS-) do substrato de queratina. Produção de queratinase em vários microorganismos foi relatado por um número de pesquisadores. Verificou-se que a queratinase em fungos, Streptomyces e bactérias foram produzidos em quase a pH alcalino e temperaturas quase termófilas. Estas enzimas têm uma ampla gama de especificidade de substrato , tal como se pode degradar outros fibroso proteína fibrina, elastina, colagénio e outras proteínas não fibrosas como a caseína, albumina de soro bovino gelatina etc. (Noval et al, 1959;.. Mukhapadhayay et ai, 1989 ; Dozie et al, 1994;.. Lin et ai, 1995; Letourneau et al, 1998;.. e Bressollier et al, 1999).
Distribuição
No primeiro Molyneux et al. (1959) tentaram isolar algumas bactérias que são capazes de degradar queratina. Ele isolado a partir de organismos do conteúdo de cistos dermoides induzidas experimentalmente a partir de meados região lateral de ovelhas. O exame da amostra de lã mostrou lã degradada com numerosos corticle e células cyticular. Encontrou ruptura de fibra de lã em tanto in vivo e in vitro . Ele mostrou que os organismos pertencem ao gênero Bacillus e o organismo era capaz de atacar proteína lã nativa. No mesmo ano Noval et al. (1959) publicaram um artigo sobre a decomposição enzimática de queratina nativa por Streptomyces fradiae . Eles mostraram enzima extracelular segregada por estas bactérias capazes de degradar o cabelo humano no seu estado nativo .
Queratinolítica proteína a partir de fungos queratinof foram relatados por Yu et al. (1968), a Asahi et al. (1985), e Willams et al. (1989). Mukhopadhay et al. (1989) relatou a produção de queratinase por Streptomyces sp. Ele isolado uma enzima extracelular homogénea indutível, que mostra um de 7,5 vezes aumento na sua actividade depois de DEAE celulose cromatografia em coluna . A enzima-actividade foi inibida por glutationa reduzida , PMSF e 2-¬Mercaptaethanol.
Williams et al. (1990) continuou o seu trabalho em cultura pena degradante enriquecido e caracterizado o organismo para o seu nível de espécie, para a primeira vez. Os microrganismos foram identificadas como Bacillus licheniformis , purificada e caracterizada a partir de queratinase pena degradar estirpe Bacillus licheniformis isolado por Williams et al. (1990) com a ajuda de membrana de ultra filtração e C-75 cromatograf ia em gel . Ele purificado enzima com maior actividade de 70 vezes. SDS-PAGE análise revelou que a queratinase purificada tinha um peso molecular de 33 kDa. Dozie et al. (1994) relataram um termoestável, alcalino-activo, proteinasefrom queratinolítica Chrysosporium keratinophylum que foi capaz de solubilizar a queratina em meio de sal mineral com a lactose-DMSO. O pH óptimo para a actividade enzimática era 9 e a temperatura óptima foi de 90 ° C. Wang et al. (1999) escalonado para cima a condição de fermentação de queratinase para fermentar uma escala piloto. Eles optimizada a condição de fermentação para um nível de aumento de 10 vezes na produção da enzima.
