Efeito gancho - Hook effect
O efeito gancho ou efeito pró- zona é um fenômeno imunológico pelo qual a eficácia dos anticorpos para formar complexos imunes às vezes é prejudicada quando as concentrações de um anticorpo ou antígeno são muito altas. A formação de complexos imunes para de aumentar com concentrações maiores e então diminui com concentrações extremamente altas, produzindo uma forma de gancho em um gráfico de medições. Existem versões do efeito gancho com excesso de anticorpos e versões com excesso de antígenos. Uma importante relevância prática do fenômeno é como um tipo de interferência que assola certos imunoensaios e ensaios nefelométricos , resultando em falsos negativos ou resultados imprecisamente baixos. Outras formas comuns de interferência incluem interferência de anticorpos, reatividade cruzada e interferência de sinal. O fenômeno é causado por concentrações muito altas de um analito ou anticorpo específico e é mais prevalente em imunoensaios de uma etapa (sanduíche) .
Mecanismo e importância in vitro
Versão com excesso de anticorpos
Em um teste de aglutinação , o soro de uma pessoa (que contém anticorpos ) é adicionado a um tubo de ensaio , que contém um antígeno específico . Se os anticorpos aglutinarem com o antígeno para formar complexos imunes , o teste é interpretado como positivo. No entanto, se houver muitos anticorpos presentes que podem se ligar ao antígeno, os locais antigênicos são revestidos por anticorpos, e poucos ou nenhum anticorpo dirigido ao patógeno é capaz de se ligar a mais de uma partícula antigênica. Como os anticorpos não fazem ponte entre os antígenos, não ocorre aglutinação. Como não ocorre aglutinação, o teste é interpretado como negativo. Nesse caso, o resultado é um falso negativo. A faixa de concentrações relativamente altas de anticorpos em que nenhuma reação ocorre é chamada de prozona .
Versão com excesso de antígenos
O efeito também pode ocorrer por excesso de antígeno, quando os anticorpos de captura e detecção tornam-se saturados pela alta concentração de analito. Neste caso, nenhum sanduíche pode ser formado pelo anticorpo de captura, o antígeno e o anticorpo de detecção. Neste caso, o antígeno livre está em competição com o antígeno capturado para detecção da ligação do anticorpo. A adição sequencial de antígeno e anticorpo, emparelhada com lavagem rigorosa, pode prevenir o efeito, assim como pode aumentar a concentração relativa de anticorpo para antígeno, mediando assim o efeito.
Os exemplos incluem altos níveis de anticorpos contra a sífilis em pacientes com HIV ou altos níveis de antígeno criptocócico levando a testes falso-negativos em amostras não diluídas. Esse fenômeno também é observado em testes sorológicos para brucelose. O teste sorológico é visto principalmente na reação de precipitação. O anticorpo que não reage é conhecido como anticorpo bloqueador e evita que o anticorpo precipitante se ligue aos antígenos. Assim, a reação de precipitação adequada não ocorre. Porém, quando o soro é diluído, o anticorpo bloqueador também o é e sua concentração diminui o suficiente para que ocorra a reação de precipitação adequada.
Observações in vivo
Lewis Thomas descreveu em suas memórias um experimento fisiológico de 1941 no qual observou o efeito da pró-zona in vivo : a imunidade em coelhos ao meningococo , que era robusta, diminuiu inesperadamente quando a imunização foi usada para induzir uma resposta aumentada de anticorpos. Em outras palavras, fazer o corpo dos coelhos produzir mais anticorpos contra essa bactéria teve o efeito contraproducente de diminuir sua imunidade a ela. Do ponto de vista de uma noção excessivamente simplista da relação anticorpo / antígeno, isso parece paradoxal , embora seja claramente lógico de um ponto de vista devidamente informado pela biologia molecular atual. Thomas estava interessado em prosseguir com sua pesquisa fisiológica, e assim permaneceu por décadas, mas sua carreira o levou a outras direções e ele não sabia de ninguém a ter feito na época de suas memórias. Um tipo de relevância que ele hipotetizou para este conceito de anticorpo bloqueador in vivo foi como um impulsionador da susceptibilidade humana a certas doenças infecciosas. Nas décadas seguintes, o conceito também demonstrou ter relevância clínica na imunoterapia com alérgenos , em que os anticorpos bloqueadores podem interferir com outros anticorpos envolvidos na hipersensibilidade e, assim, melhorar o tratamento da alergia.