Eluição -Elution

Coluna de cromatografia

Em química analítica e orgânica , eluição é o processo de extração de um material de outro por lavagem com um solvente; como na lavagem de resinas de troca iônica carregadas para remover os íons capturados.

Em um experimento de cromatografia líquida , por exemplo, um analito é geralmente adsorvido, ou "ligado a", um adsorvente em uma coluna de cromatografia líquida. O adsorvente, uma fase sólida (fase estacionária), é um pó que é revestido sobre um suporte sólido. Com base na composição de um adsorvente, ele pode ter afinidades variadaspara "segurar" outras moléculas - formando um filme fino na superfície de suas partículas. A eluição é então o processo de remoção de analitos do adsorvente executando um solvente, chamado "eluente", pelo complexo adsorvente/analito. À medida que as moléculas do solvente "eluem" ou percorrem a coluna de cromatografia, elas podem passar pelo complexo adsorvente/analito ou podem deslocar o analito ligando-se ao adsorvente em seu lugar. Depois que as moléculas do solvente deslocam o analito, o analito pode ser retirado da coluna para análise. É por isso que, à medida que a fase móvel sai da coluna, ela normalmente flui para um detector ou é coletada para análise de composição.

Prever e controlar a ordem de eluição é um aspecto chave dos métodos cromatográficos em coluna.

Série eluotrópica

Uma série eluotrópica está listando vários compostos em ordem de poder de eluição para um determinado adsorvente . O "poder de eluição" de um solvente é em grande parte uma medida de quão bem o solvente pode "puxar" um analito do adsorvente ao qual está ligado. Isso geralmente acontece quando o eluente é adsorvido na fase estacionária, deslocando o analito. Essas séries são úteis para determinar os solventes necessários para a cromatografia de compostos químicos. Normalmente, essa série progride de solventes não polares, como n-hexano , para solventes polares, como metanol ou água . A ordem dos solventes em uma série eluotrópica depende tanto da fase estacionária quanto do composto usado para determinar a ordem.

Força de adsorção (menos fortemente adsorvido → mais fortemente adsorvido)
Hidrocarbonetos saturados; haletos de alquila Hidrocarbonetos insaturados; haletos de alquenil Hidrocarbonetos aromáticos; haletos de arila Hidrocarbonetos polihalogenados Éteres Ésteres Aldeídos e cetonas Álcoois Ácidos e bases (aminas)
Poder de eluição (menor poder de eluição → maior poder de eluição)
Hexano ou pentano Ciclohexano Benzeno Diclorometano Clorofórmio Éter (anidro) Acetato de etila (anidro) Acetona (anidra) Metanol Etanol Piridina Ácido acético Água

Eluente

O eluente ou eluente é a porção "portadora" da fase móvel. Ele move os analitos através do cromatógrafo . Na cromatografia líquida , o eluente é o solvente líquido; na cromatografia gasosa , é o gás de arraste.

Eluato

O eluato é o material analito que emerge do cromatógrafo . Inclui especificamente os analitos e solutos que passam pela coluna, enquanto o eluente é apenas o transportador.

Tempo de eluição e volume de eluição

O " tempo de eluição" de um soluto é o tempo entre o início da separação (o momento em que o soluto entra na coluna) e o momento em que o soluto elui. Da mesma forma, o volume de eluição é o volume de eluente necessário para causar a eluição. Sob condições padrão para uma mistura conhecida de solutos em uma determinada técnica, o volume de eluição pode ser informação suficiente para identificar solutos. Por exemplo, uma mistura de aminoácidos pode ser separada por cromatografia de troca iônica . Sob um determinado conjunto de condições, os aminoácidos eluirão na mesma ordem e no mesmo volume de eluição.

Eluição de anticorpos

A eluição de anticorpos é o processo de remoção de anticorpos que estão ligados aos seus alvos, como a superfície dos glóbulos vermelhos . As técnicas incluem o uso de calor, ultra-som, ácidos ou solventes orgânicos. Nenhum método único é o melhor em todas as situações.

Veja também

Referências

links externos